moc1/moc2小鼠

moc1/moc2小鼠

細胞品系 : C57BL/6 Cxcr3-/-

細胞來(lái)源 : 國外

細胞鑒定 : STR鑒定已通過(guò)

細胞形態(tài) : 淋巴母多角形細胞樣,貼壁+懸浮生長(cháng)

培 養 基 : DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)(BasMed-AW-013)+FBS 10% + P/S1%500ML培養基：IMDM:F10/F12=2:1313ml:157ml培養基+FBS10%(50ml）+2.5mg/500ml胰島素+20ug/500ml+2.5ug/500ml EGF+ P/S  1% 雙抗，1%。

培養條件 :  氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%

貼壁細胞

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％(w / v） EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分

變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶/6cm培養皿中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的以保持細胞的

生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

4. 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。

5. 運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的來(lái)培養細胞。

細胞用途 : 僅供科研使用

注意事項

1. 建議加入0.25%EDTA的去后充分混勻所有細胞都接觸到，放置到培養箱進(jìn)行消化，時(shí)長(cháng)大約是3-4分鐘左右后拿出來(lái)

2. 在培養器皿的側邊進(jìn)行拍打幫助細胞脫落，拍打過(guò)程大約持續2分鐘左右才會(huì )脫落大部分細胞，如果脫落比例還不是很多，也可以重新放回培養箱繼續消化1-2分鐘后再次拿出來(lái)進(jìn)行拍打脫落，等80-90%細胞都脫落后再終止消化，離心重懸再重新鋪瓶，分散均勻。

3. MOC2細胞貼壁性和常規細胞類(lèi)似沒(méi)有特別牢固。倍增周期也沒(méi)有MOC1快。采用常規消化方法處理。

常溫發(fā)貨

收到后T25瓶消毒再放置培養箱靜置2-3小時(shí)后觀(guān)察密度和狀態(tài)拍照2-3張反饋給銷(xiāo)售，密度達標就可以傳代。前期傳代比例1:2，等再次長(cháng)滿(mǎn)后傳代時(shí)建議凍存其中一整瓶成1個(gè)1ml凍存管，另外一瓶繼續傳代，反復凍存2-3只后才擴增做實(shí)驗，以防突發(fā)情況引起斷種。

干冰發(fā)貨

常規細胞發(fā)貨凍存管2只，復蘇1只，另外一只備用，均沒(méi)有復蘇成功的情況即時(shí)留存復蘇照片通知我們。

生物安全

1. 所有動(dòng)物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過(guò)此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復蘇凍存細胞時(shí)始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒(méi)在液氮中會(huì )泄漏，并會(huì )慢慢充滿(mǎn)液氮。解凍時(shí)，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。

懸浮細胞

懸浮狀態(tài)下生長(cháng)的細胞，可以通過(guò)向培養瓶中添加培養基來(lái)維持細胞的生長(cháng)狀態(tài)，一般情況下細胞密度維持在

1×10?~1×10?個(gè)/mL

(不同細胞對密度要求不同）可以維持細胞的正常生長(cháng)。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:4的比例進(jìn)行。