Elisa試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到了廣泛的應用，然而實(shí)驗新手們面對各種各樣、動(dòng)則上上千種的Elisa試劑盒，內心應該是崩潰的。

Elisa試劑盒的操作

(一)檢驗方法

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。

2.取所需用量酶標板條，設空白對照1孔、陰性/陽(yáng)性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽(yáng)性對照孔分別加入陰、陽(yáng)性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

4.混勻，置37℃反應30分鐘。

5.扣去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。

6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鐘。

7.洗滌，同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應10分鐘。

9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調零，于450nm(可用630nm作參比波長(cháng))測定各孔吸光值(A值)。

(二)樣品準備

1.取動(dòng)物全血按常規方法制備血清，要求血清清亮，無(wú)溶血、無(wú)污染。樣品1周內可于2～8℃保存，長(cháng)期需置-20℃保存。

2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋(如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中，混勻)。陰、陽(yáng)性對照不用稀釋。

3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

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